অটোগ্রাফা ক্যালিফোর্নিকা মাল্টিপ্লেনিউক্লিয়োপলিহেড্রোভাইরাস (AcMNPV) এর কীটনাশক কার্যকারিতা এবং স্পোডোপটারা ফ্রুগিপার্ডার লার্ভাগুলিতে জৈব নিয়ন্ত্রণের প্রভাব

পতনের আর্মি ওয়ার্ম, স্পোডোপটার ফ্রুগিপার্ডা, মজুরির সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ পোকামাকড়ের একটি, যা সম্প্রতি চীনে আক্রমণ করেছে।Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) এর S এর লার্ভা উপর নিয়ন্ত্রণ প্রভাব নির্ধারণ করার জন্যএসিএমএনপিভি-এর জীবাণুনাশক কার্যকারিতা এবং জৈব নিয়ন্ত্রণের প্রভাব স্টাডি করা হয়েছে এবং জৈব পরীক্ষার পদ্ধতি এবং ক্ষেত্রের কার্যকারিতা পরীক্ষার মাধ্যমে বিশ্লেষণ করা হয়েছে।ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে মধ্যম মারাত্মক ঘনত্ব (এলসি)₅₀(এসিএমএনপিভি)^এনডিS.Frugiperda এর ইনস্টার লার্ভা ছিল 2.9x 10⁷পিআইবি/এমএল.১০ এর গড় নিয়ন্ত্রণ কার্যকারিতা⁷PIB/mL AcMNPV+Bt সাসপেনশন ((1500 mL/hm²) S.frugiperda-এর উপর ছিল ৬৮.৯৯%^th১৫ তারিখে ৬৬.৮৭%^thঅবশেষে, মৃত পোকাগুলোর ডিএনএ হোমোলজি চিহ্নিত করতে ড্যানাম্যান ৬.০ সফটওয়্যার ব্যবহার করা হয়।lef-8 এবং lef-9 জিন সিকোয়েন্স মৃত পোকামাকড় এবং S.Frugiperda এর সিকোয়েন্স 100% একই ছিলউপরের সমস্ত ফলাফল আরও নিশ্চিত করতে পারে যে AcMNPV S.Frugiperda নিয়ন্ত্রণে একটি মূল ভূমিকা পালন করতে পারে।⁷পিআইবি/এমএল AcMNPV+বিটিসাসপেনশন (১৫০০ এমএল/এমএইচ)²) উচ্চ তাপমাত্রা এবং আলোর প্রভাব এড়ানোর জন্য সানলি দিনে S.frugiperda এর তরুণ লার্ভাগুলির শীর্ষে এবং 4:00-5: 00 পরে প্রয়োগ করা উচিত,যাতে ভাইরাস প্রস্তুতি একটি ভাল ভূমিকা পালন করতে পারে এবং S এর উপর তার নিয়ন্ত্রণ প্রভাব উন্নত করতে পারে.. ফ্রিজিপিরাডা.

AcMNPV; Spodoptera frugiperda; Lepidopteranpest; লার্ভা; জৈবিক কীটনাশক;AcMNPV+Bt সাসপেনশন; কীটনাশক কার্যকারিতা; সবুজ প্রতিরোধ ও নিয়ন্ত্রণ

স্পোডোপটার ফ্রুগিপার্ডা একটি সর্বভোজী পরিভ্রমণকারী কীটপতঙ্গ যা ২০১৯ সালে মিয়ানমার থেকে প্রথম চীনে প্রবেশ করে এবং চীনের ২৬টি প্রদেশ ও পৌরসভার ১,৫১৮টি জেলায় দ্রুত ছড়িয়ে পড়েছে।চীনের খাদ্য নিরাপত্তার জন্য গুরুতর হুমকিএখন পর্যন্ত, আর্মিওয়ার্মের নিয়ন্ত্রণ কৌশল অনুযায়ী, আর্মিওয়ার্মের প্রাদুর্ভাব নিয়ন্ত্রণে এখনও রাসায়নিক কীটনাশকের ভারী ব্যবহারের উপর নির্ভর করে।রাসায়নিক কীটনাশকের অত্যধিক ব্যবহার সহজেই কীটপতঙ্গের প্রতিরোধ ক্ষমতা সৃষ্টি করতে পারে, পুনরায় বিস্তৃত এবং পরিবেশগত অবশিষ্টাংশ এবং দূষণ। একটি সিরিজ গুরুতর সমস্যা আধুনিক কৃষির টেকসই উন্নয়নকে মারাত্মকভাবে সীমাবদ্ধ করেছে।জৈবিক নিয়ন্ত্রণ পদ্ধতি বা বায়োপেস্টিসাইড প্রতিস্থাপন ব্যবহার. আর্মিওয়ার্ম নিয়ন্ত্রণে কীটনাশক ব্যবহারের গুরুত্ব ক্রমশ বাড়ছে এবং এটি ক্রমবর্ধমান মনোযোগ পেয়েছে।

Autographa californica মাল্টিপল নিউক্লিওপলিহেড্রোভাইরাস AcMNPV একটি মাল্টি-গ্রেন এমবেডেড নিউক্লিওপলিহেড্রোসিস ভাইরাস যা আর্জিরিয়া আলফার লার্ভা থেকে বিচ্ছিন্ন।এটি ৩০ টিরও বেশি প্রজাতির লেপিডোপ্টারান কীটপতঙ্গ যেমন বিট মলকে ক্রস-ইনফেক্ট করতে পারেকলা মট, আর্জিরিয়া আর্জিরা এবং ক্যালিপেট্রা টেরিস্টোয়েডসবিটি এবং অন্যান্য কীটনাশক এবং লক্ষ্যহীন কীটনাশক ভাইরাসগুলির সাথে মিশ্রিত টাইপটি সিঙ্ক্রোনাস হিসাবে অনেক নক্চুয়েড কীটপতঙ্গের উপর সুস্পষ্ট সিঙ্ক্রোনাস প্রভাব ফেলেAcMNPV হল উহান ইউনিওসিস বায়োলজিকাল টেকনোলজি কোং, লিমিটেড দ্বারা বিকশিত পোকামাকড়ের ভাইরাসের একটি নতুন বায়োপেস্টিসাইড।এটি Argyria alfalfa নিউক্লিয়ার পলিহেড্রোসিস ভাইরাস এবং Bt শক্তিশালী ভাইরাস সিনার্জিস্টের সংমিশ্রণ. ভাল কীটনাশক কার্যকারিতা সঙ্গে, A ব্যাপকভাবে সবজি, ফল গাছ, ধান এবং অন্যান্য ক্ষেত্রে প্রয়োগ করা হয়েছে। the insecticidal activity and biocontrol effect of Autographa californica mul-tiple nucleopolyhedrovirus(AcMNPV) against Spodoptera frugiperda were detected and evaluated by laboratory activity assay and field experiment, যাতে কর্নিতে স্পোডোপটার ফ্রুগিপার্ডার জৈবিক নিয়ন্ত্রণে নিউক্লিয়ার পলিহেড্রোসিস ভাইরাসের বিস্তৃত প্রয়োগের জন্য তথ্য সরবরাহ করা যায়।এটি আর্মিওয়ার্ম নিয়ন্ত্রণে AcMNPV প্লাস Bt এর সাসপেনশন এজেন্টের নিবন্ধন এবং প্রয়োগের জন্য তাত্ত্বিক ভিত্তি প্রদান করে।.

পরীক্ষিত ভাইরাসটি Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) ছিল। ২০১৯ সালের ২০ মে, হুবেই প্রদেশের সিয়ানটাও শহরের ময়না ক্ষেত্র থেকে Spodoptera frugiperda সংগ্রহ করা হয়েছিল।এবং ভাইরাস সংক্রমণের স্ক্রিনিং পরীক্ষা উহান ইউনিওসিস বায়োলজিকাল টেকনোলজি কোং এর পরীক্ষাগারে পরিচালিত হয়েছিল।., LTD. (যার মধ্যে Autographa Californica মাল্টিপ্লেনিউক্লিওপলিহেড্রোভাইরাস AcMNPV Spodoptera frugiperda এর বিরুদ্ধে উচ্চ সংক্রামক কার্যকারিতা রয়েছে),স্পোডোপটার ফ্রুগিপার্ডার লার্ভাগুলি বৃদ্ধি এবং প্রজননের জন্য উত্থাপিত হয়েছিল. ভাইরাসে আক্রান্ত মৃত লার্ভাগুলিকে পানি দিয়ে পিষে ফেলা হয়, গাজার 3 স্তর দিয়ে ফিল্টার করা হয় এবং ফিল্টারটি 600r/min এবং 300r/min এ সেন্ট্রিফুগ করা হয়। মাইক্রো কাউন্টটি 1.8 * 10 ছিল¹⁰প্রতি মিলিগ্রামে ভাইরুলাস পলিহেড্রা ((পলিহেড্রাল ইনক্লুশনবডি পিআইবি), অর্থাৎ পলিহেড্রোসিস ভাইরাসের একটি খাঁটি প্রযুক্তিগত গ্রেড পেতে ((1.8 x 10¹⁰পিআইবি/এমএল), কম তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয় এবং আলাদা করা হয়।

পরীক্ষিত জৈবিক এজেন্টটি ছিল Autographa california nuclear polyhedrosis.Bacillus thuringiensis সংক্ষিপ্ত AcNPV.Bt ((1.0 * 107 PIB/mL) । এটি উহান ইউনিওএসিস বায়োলজিকাল টেকনোলজি কোং,লিমিটেড এবং এর সহায়ক সংস্থা উহান চুকিয়াং বায়োলজিকাল টেকনোলজি কো দ্বারা উত্পাদিত., LTD.

পরীক্ষামূলক পোকামাকড়টি ছিল স্পোডোপটার ফ্রুগিপার্ডা। ২০ জুলাই, ২০১৯-এ, স্পোডোপটার ফ্রুগিপার্ডার লার্ভাগুলি ড্যাচংঝেন শহরের বানকিয়াও গ্রামের গ্রীষ্মকালীন ভুট্টা ক্ষেত্র থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল,টংশান কাউন্টি, হুবেই প্রদেশ, এবং হুবেই কৃষি বিজ্ঞান একাডেমির উদ্ভিদ সুরক্ষা মাটি এবং সার গবেষণা ইনস্টিটিউটের পরীক্ষাগারে ফিরিয়ে আনা হয়েছে।সতেজ এবং নরম ভুট্টা পাতা একক মাথা দিয়ে একবার ব্যবহারযোগ্য প্লাস্টিকের পেট্রি স্ক্রাব (ব্যাসার্ধ 8 সেমি) খাওয়ানো হয়, উচ্চতা 3 সেমি) । অভ্যন্তরীণ খাওয়ানোর শর্ত ছিল: (((২৫±1) °C এবং আপেক্ষিক আর্দ্রতা 60%-70%, ফোটোপেরিওড 16L:8D। একাধিক প্রজননের পরে,তাজা এবং নির্বীজিত ডিম ব্লক ব্যবহারের জন্য সংরক্ষণ করা হয়.

ছয়টি ঘনত্ব গ্র্যাডিয়েন্ট, ১.০ * ১০⁹, ১.০ * ১০⁸, ১.০ * ১০⁷, ১.০ * ১০⁶, ১.০ * ১০⁵, ১.০ * ১০⁴এই পরীক্ষায় ডিজাইন করা হয়েছিল। প্রথমে AcNPV এর TC 1.0 * 10 তে দ্রবীভূত করা হয়েছিল।⁹পিআইবি/এমএল, এবং তারপর বিভিন্ন ঘনত্বের অন্যান্য দ্রাবক পেতে 10 বার দ্রবীভূত করা হয়। পরীক্ষাটি ব্লাঙ্ক কন্ট্রোল দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। মোট 7 টি প্রক্রিয়া সম্পন্ন করা হয়েছিল,প্রতিটি প্রক্রিয়া 3 বার পুনরাবৃত্তি.

পাতার অংশ খাওয়ানোর পদ্ধতি গ্রহণ করা হয়েছিল, অর্থাৎ, তাজা ভুট্টা তরুণ পাতা (দৈর্ঘ্য ২ সেমি * প্রস্থ ২ সেমি) প্রথমে ভাইরাস সাসপেনশন স্প্রে দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল, তারপরে লার্ভা খাওয়ানো হয়েছিল,এবং একক মাথা পেট্রি থলিতে খাওয়া হয়. খাওয়ানোর স্ট্রিপগুলি ছিলঃ তাপমাত্রা (25±1) °C, ফেজ-টু-হিউমিডিটি (60% ~ 70%), ফোটোপেরিওড (16L:8D) । বিষাক্ত ভুট্টা পাতা খাওয়ার পরে, তাজা অ-বিষাক্ত ভুট্টা পাতা অবিলম্বে যোগ করা উচিত।আর্মিওয়ার্মের ৪৮টি দ্বিতীয় স্তরের লার্ভাকে বারবার চিকিত্সা করা হয়েছিল।. রেফারেন্স পার্ট ৯{9-11}, মল পরিবারের কোষ এবং হোস্টের মধ্যে ভাইরাসের বিস্তারের পরিবর্তন বিবেচনা করে,সংক্রমণের ৭ এবং ১০ দিন পর ভাইরাসের কারণে মৃত পোকামাকড়ের সংখ্যা এবং মোট মৃত পোকামাকড়ের সংখ্যা পরীক্ষা করা হয়, এবং মৃত্যুর হার গণনা করা হয় এবং LC50 গণনা করা হয়।

মাঠের কার্যকারিতা পরীক্ষাটি হুবেই প্রদেশের টোংশান কাউন্টির চুয়াংওয়াং টাউনের শাওয়ুয়ান গ্রামের গ্রীষ্মের ময়দা ক্ষেত্রে পরিচালিত হয়েছিল। পরীক্ষার প্লটটি মোট 1500 মিটার^２, মাটির ধরন হল ক্যালসিয়াম মাটি, পিএইচ মান ৬।8, জৈব পদার্থের পরিমাণ ১৩.৯% এবং উর্বরতা মাঝারি থেকে উচ্চ।মমুর সারা বছর ধরে রোপণ করা হয় এবং মুরগীর জাতটি হ'ল Xiyu নং ৩। ১৩ জুলাই,2020৪৫% কম্পাউন্ড ফার্টিলাইজার ৭৫০ কেজি/হিমি^２২০১৯ সাল থেকে, এই ক্ষেত্রে ফাল আর্মিওয়ার্মের একটি গুরুতর ঘটনা ঘটেছে।

মোট ১০ মিলিয়ন AcMNPV.BT সাসপেনশন (১৫০০ এমএল/ এইচএম)²) এবং ১৫% ইমামেকটিন বেঞ্জোয়েট। ইন্ডোকারব সাসপেনশন (৩০০ মিলি/ এমএইচএম)²), সাধারণভাবে ব্যবহৃত কীটনাশক এবং ব্লাঙ্ক কন্ট্রোলের সাথে 3 টি চিকিত্সা করা হয়েছিল। প্রতিটি চিকিত্সা 4 বার পুনরাবৃত্তি করা হয়েছিল, মোট 12 টি পরীক্ষামূলক প্লট, প্রতিটি 100 মিটার এলাকা জুড়ে।²

২৬ আগস্ট, ২০২০-এর বিকেলে (যখন স্পোডোপটারা ফ্রুগিপার্ডার লার্ভা প্রায়শই দেখা যায়), সন্ধ্যায় একবার কীটনাশকটি স্প্রে করুন।লেবাং ব্র্যান্ড 3WBJ-16DZ মাল্টি ফাংশন ব্যাকপ্যাক বৈদ্যুতিক স্প্রে ব্যবহার করা হয়, 0.40 ~ 0.60 এমপিএ এর কাজের চাপ, 1 মিমি এর খোলার ব্যাসার্ধ, এবং 60 ~ 85L / ঘন্টা প্রবাহের হার। কীটনাশক প্রয়োগের দিনটি সূর্যালোকযুক্ত, তাপমাত্রা 23-32 ডিগ্রি সেলসিয়াস।১ তারিখে সমীক্ষা পরিচালনা করুনপ্রয়োগের পর তৃতীয়, পঞ্চম, সপ্তম, দশম এবং পনেরোতম দিন। তদন্তের সময়, প্রতিটি প্লট থেকে 10 টি এলোমেলো নমুনা পয়েন্ট নেওয়া হয়েছিল এবং প্রতিটি পয়েন্টে 10 টি উদ্ভিদকে অবিচ্ছিন্নভাবে পরিদর্শন করা হয়েছিল,মোট ১০০টি উদ্ভিদ. প্রতিটি ভুট্টা উদ্ভিদে জীবন্ত পোকামাকড়, মৃত্যু, বিষ এবং প্রাকৃতিক শত্রুদের সংখ্যা রেকর্ড করা হয়েছিল। প্রাসঙ্গিক গণনার সূত্রটি নিম্নরূপঃ

পোকামাকড় হ্রাসের হার = ((প্রয়োগের আগে জীবিত পোকামাকড়ের সংখ্যা - প্রয়োগের পরে জীবিত পোকামাকড়ের সংখ্যা) /প্রয়োগের আগে জীবিত পোকামাকড়ের সংখ্যা

প্রতিরোধ ও নিয়ন্ত্রণের প্রভাব= (( চিকিত্সা এলাকায় পোকামাকড় হ্রাস- নিয়ন্ত্রণ এলাকায় পোকামাকড় হ্রাস) / ((100- নিয়ন্ত্রণ এলাকায় পোকামাকড় হ্রাস) * 100%

1) পরীক্ষার ভাইরাস নমুনা। ইনডোর কার্যকলাপ নির্ধারণের জন্য ACMNPV মাদার তরল নির্বাচন করুন (নমুনা 1), জৈবিক প্রস্তুতি 10 মিলিয়ন ACMNPV.Bt SC (নমুনা 2),মাঠের কার্যকারিতা পরীক্ষার পর ভাইরাস সংক্রামিত পোকামাকড়ের মৃতদেহ (প্রমাণ 3), এবং দ্বিতীয় প্রজন্মের আর্মিওয়ার্ম লার্ভাগুলি 10 মিলিয়ন ACMNPV এর মধ্যে AcMNPV কিনা তা যাচাই করার জন্য পরীক্ষার ভাইরাস নমুনা হিসাবে নমুনা 3 (নমুনা 4) এ পোকামাকড়ের মৃতদেহ দ্বারা সংক্রামিত সংগ্রহ করা হয়েছিল।Bt এর পতন সেনা কৃমি লার্ভাদের বিরুদ্ধে ব্যাকটিরিসাইড কার্যকারিতা রয়েছে.

2) ডিএনএ এক্সট্রাকশন। AcMNPV নমুনা 1.0 mL নিন, নিষ্কাশিত পানি 99.0 mL যোগ করুন, এবং 1 মিনিটের জন্য পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে oscillate। oscillation পরে 300μL সাসপেনশন নিন, 100μL ক্ষারীয় ক্র্যাকিং সমাধান যোগ করুন,৩০ মিনিট ধরে ৩৭ ডিগ্রি সেলসিয়াসে ওয়াটার বাথ. 200μL Tris·HCl বাফার যোগ করুন এবং 10000 r/min এ 8 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফুগ করুন। একটি সেন্ট্রিফুগন টিউব মধ্যে supernatant নিতে, 5μL Protease K এবং 60 μL SDS যোগ করুন, 2 ঘন্টা জন্য 65 °C এ জল স্নান,অপসারণ এবং ঘরের তাপমাত্রায় ঠান্ডা. 650μL মিশ্রণ এল Tris স্যাচুরেটেড ফেনল ভাল যোগ করুন, 5 মিনিটের জন্য 10000 r/min এ সেন্ট্রিফুগ করুন, এবং একটি নতুন সেন্ট্রিফুগ টিউব মধ্যে supernatant নিতে।650μL ফেনল এবং ক্লোরোফর্ম মিশ্রিত তরল যোগ করুন (ভলিউম অনুপাত 1১) মিশ্রণ, ৫ মিনিট ধরে ১০০০ r/min এ সেন্ট্রিফুগ করুন, এবং তারপরে নতুন সেন্ট্রিফুগ টিউবে সুপারনেটেন্টটি নিন। ক্লোরোফর্ম এবং আইসোঅ্যামাইল অ্যালকোহলের মিশ্র তরল (ভলিউম অনুপাত ২৪ঃ১) এর 650μL যোগ করুন,৫ মিনিট ধরে ১০০০ r/min এ সেন্ট্রিফুগ করুন, এবং অবশেষে একটি নতুন সেন্ট্রিফুগ টিউব মধ্যে supernatant নিতে একটি spectrophotometer ব্যবহার করে ডিএনএ ঘনত্ব পরিমাপ।

3) পিসিআর পরিবর্ধন। টি 3 সুপার মিক্স স্ট্যান্ডার্ড সিস্টেম ব্যবহার করেঃ নমুনা ডিএনএ 2 μ L. আগে এবং পরে জন্য 0.5μL প্রাইমার, টি 3 সুপার মিক্স 18μL এবং ddH2O7μL। পিসিআর পরিবর্ধনের শর্ত 95 °C।প্রাক-ডেনেচারেশনের ৩ মিনিট পর, নিম্নলিখিত চক্রগুলি সম্পাদন করা হয়ঃ 15 সেকেন্ডের জন্য 98 °C, 20 সেকেন্ডের জন্য 52 °C, 20 সেকেন্ডের জন্য 72 °C, এবং অবশেষে 5 মিনিটের জন্য 72 °C, মোট 42 বার চক্র।

4) ডিএনএ অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস। পিসিআর অ্যাম্প্লিফাইং পণ্য 2μL এবং 5 কেবি ডিএনএ মার্কার নিন এবং অ্যাগারোজ জেল এবং 180 ভি এ 20 মিনিটের জন্য ইলেক্ট্রোফোরেটিক রাখুন।জেল ইমেজিং সিস্টেমে পিসিআর পণ্যগুলি পর্যবেক্ষণ করুন.

পোল্হ আপস্ট্রিম প্রাইমার:

এজিজিটিটিসিসিসিএজিটিসিএজিজিটিসিএজি-জিএটিসিটি

পোল্হ ডাউনস্ট্রিম প্রাইমারঃ

GAGCGGATAATTTCACACTGGTGTGTG-CAAACTCCTT

লেফ-৮ আপস্ট্রিম প্রাইমার:

AGGGTTTCCCAGTCCACGCACGGGAAAT-জিএসি

লেফ-৮ ডাউনস্ট্রিম প্রাইমার:

গ্যাজগ্যাটাট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্টট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট

লেফ-৯ আপস্ট্রিম প্রাইমার

এজিজিটিটিসিসিসিএজিটিসিএজিএজিএজিজিটিসিজিজিজি

লেফ-৯ ডাউনস্ট্রিম প্রাইমার:

গ্যাজগ্যাটাটাট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্ট্টট্টটটটটটটটটটটটট

অবশেষে, DNAMAN6.0 সফটওয়্যারটি ব্যবহার করে পরিমাপ করা polh, lef-8 এবং lef-9 ক্রমগুলি তুলনা করুন।

পরীক্ষামূলক তথ্য IBM SPSS 22.0 ডেটা পরিসংখ্যান বিশ্লেষণ সফটওয়্যার ব্যবহার করে প্রক্রিয়া করা হয়েছিল।

ভাইরাস ইনসেক্টিসাইড কার্যকারিতা নির্ধারণের পরীক্ষায়, প্রতিটি ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা মৃত এবং জীবিত পোকামাকড়ের সংখ্যা গণনা করা হয়,এবং মৃত্যুর হার এবং সংশোধিত মৃত্যুর শতাংশ গণনা করা হয়, এবং সম্ভাব্যতা মান রূপান্তরিত. প্রতিটি চিকিত্সার ঘনত্ব lg মান রূপান্তরিত হয়।ভাইরুল্যান্স রিগ্রেশন সমীকরণ (প্লান্ট ± এসই) কাজের সম্ভাব্যতা মান এবং ওজন দ্বারা গণনা করা হয়, এবং এলসি₅₀মান এবং তার 95% নির্ভরযোগ্যতা সীমা, এবং অবশেষে কি-চতুর্থাংশ পরীক্ষা সঞ্চালন ((²) ফিল্ড কন্ট্রোল এফেক্ট পরীক্ষায়, প্রতিটি চিকিত্সায় জীবিত পোকামাকড়ের সংখ্যা গণনা করা হয়েছিল, কীটপতঙ্গ হ্রাসের হার গণনা করা হয়েছিল।নিয়ন্ত্রণ প্রভাব মাইক্রোসফট এক্সেল সম্পাদনা সূত্র ব্যবহার করে গণনা করা হয়বিশ্লেষণের জন্য ডানকান পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছিল, এবং চিকিত্সার মধ্যে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য তুলনা করার জন্য একমুখী ANOVA ব্যবহার করা হয়েছিল,

টেক্সটের চার্টগুলো মাইক্রোসফট এক্সেল সফটওয়্যার ব্যবহার করে তৈরি করা হয়েছে।

অভ্যন্তরীণ কার্যকলাপ পরীক্ষার ফলাফল (টেবিল ১) দেখায় যে ৭ দিনের চিকিত্সার পর, LC₅₀AcMNPV এর স্পোডোপটার ফ্রুগিপার্ডার ২য় স্তরের লার্ভাদের উপর প্রভাব ফেলে ৪.১x১০⁷পিআইবি/এমএল, এবং এলসি₉₀হল ১.০৫ x১০⁸পিআইবি/এমএল। ১০ দিনের চিকিত্সার পর, এলসি₅₀AcMNPV-এর ২য় স্তরের লার্ভাদের উপর প্রভাব 2.9x10⁷পিআইবি/এমএল, এবং এলসি₉₀৭.৮x১০⁷পিআইবি/এমএল। এলসি₅₀এবং এলসি₉₀৭ দিনের চিকিৎসার পর ফাল আর্মিওয়ার্মের ২য় স্তরের লার্ভাদের উপর AcMNPV এর প্রভাব ১০ দিনের বেশি ছিল।যেটি নির্দেশ করে যে AcMNPV 7 দিনের পর Spodoptera frugiperda লার্ভাদের বিরুদ্ধে ভাল কীটনাশক কার্যকারিতা প্রদর্শন করে.

মাঠের কার্যকারিতা পরীক্ষার ফলাফল দেখায় যে ১০ মিলিয়ন AcMNPV।²স্পোডোপটারা ফ্রুগিপার্ডার লার্ভাগুলিতে তুলনামূলকভাবে ধীর প্রভাব ছিল। স্প্রে করার পর ১ম, ৩য় এবং ৫ম দিনে গড় নিয়ন্ত্রণ প্রভাব যথাক্রমে ১১.৫৭%, ১৬.২৩% এবং ১৫.৫৬% ছিল।স্প্রে করার পর সপ্তম দিনে গড় কন্ট্রোল প্রভাব মাত্র ২১% ছিল।.88%। তবে স্প্রে করার দশম দিনে, পোকামাকড় নিয়ন্ত্রণের প্রভাব হঠাৎ 68.99% এ বৃদ্ধি পেয়েছে এবং স্প্রে করার পরে 15 তম দিনে গড় নিয়ন্ত্রণের প্রভাবও 66.87% ছিল। তবে,রাসায়নিক এজেন্টের তুলনায় Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioner 15% (300mL/hm)²), এটি স্পোডোপটারা ফ্রুগিপার্ডার লার্ভাদের উপর একটি ভাল হত্যার প্রভাব ফেলেছিল, যা দ্রুত পোকামাকড়ের জনসংখ্যার সংখ্যা হ্রাস করতে পারে।ওষুধ গ্রহণের পর ৭ম দিন ৯১.39%, 92.66%, 90.71% এবং 87.19% যথাক্রমে। তবে দশম দিনে গড় নিয়ন্ত্রণ প্রভাব হ্রাস পেতে শুরু করে, শুধুমাত্র 67.63% পর্যন্ত।এবং ১৫তম দিনে গড় কন্ট্রোল এফেক্ট কমে ৫১% হয়েছে।.৬০%। বিস্তারিত জানার জন্য ২ নং টেবিল দেখুন।

একই সময়ে, আমরা দেখতে পেলাম যে নিয়ন্ত্রণ অঞ্চলে পোকামাকড়ের হ্রাসের হার চিকিত্সার পরে ১ম, ৩য় এবং ৫ম দিনে নেতিবাচক ছিল, যা পোকামাকড়ের সংখ্যা বৃদ্ধির ইঙ্গিত দেয়।৭ম দিন চিকিৎসা শেষে, এটি ইতিবাচক হয়ে উঠতে শুরু করে (হানুক জনসংখ্যা হ্রাস পেতে শুরু করে) । 10 তম এবং 15 তম দিনে হানুকের গড় হ্রাসের হার যথাক্রমে 38.25% এবং 47.00% ছিল,যা সম্ভবত এই সত্যের সাথে সম্পর্কিত যে স্পোডোপ্টেরা ফ্রুগিপার্ডার কিছু লার্ভা মাটিতে পপিং শুরু করে এবং 10-15 দিনের পরে প্রজন্মগুলি ওভারল্যাপ করে.

সংক্ষেপে, দেখা যায় যে ১০ মিলিয়ন AcMNPV. Bt SC (1500 mL/hm)²) স্পোডোপটার ফ্রুগিপার্ডার উপর একটি নির্দিষ্ট নিয়ন্ত্রণ প্রভাব আছে, কিন্তু এর প্রভাব ধীর, এবং এর কার্যকারিতা অ্যাপ্লিকেশন পরে প্রায় 10-15 দিন।

মাঠের পরীক্ষার সময়, 10 মিলিয়ন AcMNPV. Bt স্থগিতাদেশের প্রভাবগুলি কর্ণের উপর কীটপতঙ্গের প্রাকৃতিক শত্রু যেমন মাকড়সা, লেডিবাগ এবং বিটগুলির উপরও তদন্ত করা হয়েছিল।ফলাফল দেখায় যে ১০ মিলিয়ন AcMNPV. বিটি সাসপেনশনের প্রাকৃতিক শত্রুদের যেমন মাকড়সা, লেডিবাগ এবং বিটগুলির উপর উল্লেখযোগ্য ক্ষতি হয়নি, প্রতি ১০০টি উদ্ভিদে গড়ে ১৩.৪ প্রাকৃতিক শত্রু রয়েছে। তবে,রাসায়নিক এজেন্ট ইমামেকটিন বেঞ্জোয়েট+ ইন্ডক্সায়ার কন্ডিশনারব ১৫% সাসপেনশন প্রাকৃতিক শত্রুদের যেমন মাকড়সাদের উপর উল্লেখযোগ্য বিষাক্ত প্রভাব ফেলেছেচিকিত্সার পর প্রথম দিনেই, ১০০টি ভুট্টা গাছের উপর স্বাভাবিক শত্রুদের গড় সংখ্যা ছিল মাত্র ৩টি।1, এবং চিকিত্সার তৃতীয় দিনে, বিভিন্ন ধরণের শুধুমাত্র 5.2 প্রাকৃতিক শত্রু (চিত্র 1) পাওয়া যায়।বিটি সাসপেনশনের ক্ষতিগ্রস্তদের প্রাকৃতিক শত্রুদের বিরুদ্ধে একটি ভাল প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব রয়েছেএমামেকটিন বেঞ্জোয়েট+ ইন্দোক্সায়ার কন্ডিশনার ১৫% সাসপেনশন প্রাকৃতিক শত্রুদের তুলনামূলকভাবে বেশি ক্ষতি করে।

বিভিন্ন পরীক্ষামূলক নমুনার পিসিআর পরিবর্ধনের ফলাফল দেখিয়েছে যে 1, 2, 3 এবং 4 নমুনার পোলহ, লেফ -8 এবং লেফ -9 এর পরিবর্ধন ভগ্নাংশগুলি ধারাবাহিক এবং সঠিক আকারে ছিল।পোলার পিসিআর পণ্য, লেফ-৮ এবং লেফ-৯ জিন ছিল ০।54০।716, এবং যথাক্রমে ০.২৯ কেবি (চিত্র ২), যা প্রমাণ করে যে AcMNPV এর স্পোডোপটারা ফ্রুগিপার্ডার লার্ভাদের বিরুদ্ধে কীটনাশক কার্যকারিতা রয়েছে।

অবশেষে, DNAMAN 6.0 সফটওয়্যারটি পোলহ, লেফ-৮ এবং লেফ-৯ এর বর্ধিত টুকরো টুকরো 1, 2, 3 এবং 4 নমুনায় (চিত্র 3) ক্রম সারিবদ্ধকরণ সম্পাদন করতে ব্যবহৃত হয়েছিল।ফলাফল দেখিয়েছে যে পোলহের বর্ধিত ক্রমগুলির মধ্যে সাদৃশ্য, lef-8 এবং lef-9 নমুনা 1, 2, 3, এবং 4 এ 100% ছিল, যা নির্দেশ করে যে নমুনা 1, 2, 3, এবং 4 সব একই ভাইরাস AcMNPV থেকে উদ্ভূত।

AcMNPV একটি পোকামাকড়ের রড আকৃতির ভাইরাস যা খাওয়ানোর মাধ্যমে পোকামাকড়ের শরীরকে সংক্রামিত করে।ধীরে ধীরে পুরো শরীরকে সংক্রামিত করে এবং শেষ পর্যন্ত মৃত্যুর দিকে পরিচালিত করেএই গবেষণার ফলাফল থেকে জানা যায় যে, AcMNPV এর Spodoptera frugiperda এর লার্ভাদের বিরুদ্ধে ভাল জৈবিক কার্যকারিতা রয়েছে। সপ্তম এবং দশম দিনে এর LC ছিল 4.1x107 এবং 2.9x107PIB/m,সংশ্লিষ্ট১০ মিলিয়ন AcMNPV.Bt এর মিশ্র সাসপেনশন (১৫০০ mL/hm)²) চিকিত্সার দশম এবং পনেরোতম দিনে ভাল গড় নিয়ন্ত্রণ প্রভাব ছিল, যথাক্রমে 68. 99% এবং 66. 87%, এবং প্রাকৃতিক শত্রুদের জন্য নিরাপদ ছিল।গবেষণা ও উন্নয়নের গতি ত্বরান্বিত করা উচিত যাতে AcMNPV Spodoptera frugiperda এর জৈবিক নিয়ন্ত্রণে আরও বড় ভূমিকা পালন করতে পারেউহান চুকিয়াং বায়োটেকনোলজি কো, লিমিটেড দ্বারা উত্পাদিত 10 মিলিয়ন AcMNPV.Bt স্থগিতাদেশটি AcMNPV এবং বায়োপেস্টিসাইড Bacillus thuringiensis (Bt) এর একটি যৌগ,যা ভাইরাসের কীটনাশক কার্যকারিতা উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত করতে পারে. কারণ Bt একটি বিস্তৃত স্পেকট্রামের কীটনাশক যা ভাল মাইক্রোবিয়াল কীটনাশক কার্যকারিতা সহ, যখন AcMNPV Bt এর সাথে মিলিত হয়, তখন একক ফর্মুলেশনের তুলনায় এর বিষাক্ততা উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত হওয়া উচিত.এটি কেবল বিটি এর কীটনাশক পরিসীমা প্রসারিত করে না, তবে এর বিষাক্ততাও বাড়ায়, একাধিক কীটপতঙ্গ নিয়ন্ত্রণের জন্য একটি একক ফর্মুলেশন ব্যবহার করার লক্ষ্য অর্জন করে।এই কারণেই ১০ মিলিয়ন এসিএমএনপিভি স্থগিত করা হয়েছে।.Bt শাকসবজি, ফলের গাছ এবং চালের মধ্যে ব্যাপকভাবে প্রচার করা যেতে পারে। অতএব, 10 মিলিয়ন AcMNPV.Bt ভুট্টাতে স্পোডোপটারা ফ্রুগিপার্ডার জন্য সবুজ নিয়ন্ত্রণ এজেন্ট হিসাবে প্রচার করা যেতে পারে

এই গবেষণায়, ক্ষেত্রের কার্যকারিতা পরীক্ষা পরিচালনার সময়, নিয়ন্ত্রণ অঞ্চলে পোকামাকড়ের জনসংখ্যার দ্রুত হ্রাসের ক্ষেত্রে (পঞ্চদশ দিনে পোকামাকড়ের হ্রাসের হার 47.00% পৌঁছেছে),10 মিলিয়ন AcMNPV এর গড় নিয়ন্ত্রণ প্রভাব.বিটি সাসপেনশন (১৫০০ মিলি/মিটার)²চিকিৎসা শেষে পঞ্চদশ দিনে এই হার ৬৬.৮৭% ছিল, যা দ্রুত বৃদ্ধিপ্রাপ্তির প্রবণতা দেখায়।²০১.১৫ মিলিগ্রাম AcMNPV.Bt সাসপেনশন (১৫০০ মিলিগ্রাম/হেক্টর)²) Spodoptera frugiperda এর উপর ১০ থেকে ১৫ দিনের মধ্যে একটি নির্দিষ্ট নিয়ন্ত্রণ প্রভাব ফেলে।জৈবিক কীটনাশকগুলির ধীর কার্যকারিতা এবং স্পোডোপটারা ফ্রুগিপার্ডা লার্ভগুলির সংক্ষিপ্ত জীবনকাল এবং ওভারল্যাপিং প্রজন্ম বিবেচনা করে, জৈবিক কীটনাশক (বিশেষত ভাইরাল প্রিপারেটস) এর ক্ষেত্রের কার্যকারিতা পরীক্ষা করার সময় তদন্তের সংখ্যা বৃদ্ধি এবং তদন্তের সময় বাড়ানোর পরামর্শ দেওয়া হয়,যা আরো আদর্শ পরীক্ষামূলক ফলাফল অর্জন করতে পারেসংক্ষেপে, জৈবিক এজেন্টগুলির তুলনায় রাসায়নিক এজেন্টগুলির কীটপতঙ্গের উপর তুলনামূলকভাবে উচ্চতর হত্যা প্রভাব রয়েছে এবং দ্রুত কার্যকর হয়।তারা কীটপতঙ্গের প্রাদুর্ভাবের সময় জরুরী প্রতিরোধ ও নিয়ন্ত্রণ ব্যবস্থা হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে. যখন কীটপতঙ্গের ক্ষয়ক্ষতি তুলনামূলকভাবে হালকা হয়, তখন জৈবিক কীটনাশক রাসায়নিক কীটনাশককে প্রতিস্থাপন করতে পারে সবুজ প্রতিরোধ ও নিয়ন্ত্রণের ব্যবস্থাগুলির মধ্যে একটি হিসাবে,এর ফলে পরিবেশ দূষণ হ্রাস পাবে এবং কৃষি জৈবিক পরিবেশ রক্ষা করা হবে।.

উপরন্তু, এই গবেষণায় ব্যবহৃত Polh (পলিহেড্রিন) জিনটি একটি প্রকারের পলিহেড্রাল প্রোটিন প্রোমোটার, এটি এবং P10 হল ব্যাকুলোভাইরাস এক্সপ্রেশন ভেক্টর সিস্টেমে (BEVS) সর্বাধিক ব্যবহৃত প্রোমোটার,উভয়ই ভাইরাল সংক্রমণের শেষ পর্যায়ে অত্যন্ত প্রকাশিত হয়^[13]যাইহোক, পি 10 প্রোমোটারের কার্যকারিতা পোল প্রোমোটারের তুলনায় কম, তাই পোল প্রোমোটার প্রায়শই বহির্মুখী প্রোটিনের অভিব্যক্তির জন্য ব্যবহৃত হয়।lef-8 জিনটি ভাইরাসের নিজস্ব RNA পলিমারেজের বৃহত্তম উপবিভাগকে কোড করতে পারে, এবং এটি একটি প্রকারের দেরী প্রকাশের কারণ^[14]. lef-৯ একটি প্রকারের দেরী এক্সপ্রেশন ফ্যাক্টর যা ব্যাকুলোভাইরাসগুলিতে lef-৪, lef-৮ এবং p47-এর সাথে প্রোটিন কমপ্লেক্স সাবইউনিট কোড করে।গবেষণায় দেখা গেছে যে lef-9 জিনের অভাবযুক্ত ভাইরাসগুলি সংক্রামক কার্যকারিতা সহ ভাইরাস কণা তৈরি করতে পারে না, যখন lef-9 জিনের ভাইরাস ভাইরাসটির সংক্রামক কার্যকলাপ পুনরুদ্ধার করতে পারে।lef-9 জিনটি সংক্রামক কার্যকলাপের সাথে BV (Budded Virus) গঠনের জন্য ব্যাকুলোভাইরাসগুলির জন্য একটি প্রয়োজনীয় জিন^[15]এটি দেখা যায় যে lef-8 এবং lef-9 জিনগুলি বিভিন্ন ধরণের নিউক্লিয়ার পলিহেড্রোসিস ভাইরাসে উচ্চ সংরক্ষণশীলতা রয়েছে,সুতরাং lef-8 এবং lef-9 জিনগুলি ভাইরাস টাইপ সনাক্তকরণের ভিত্তি হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারেঅতএব, এই গবেষণায় পোলহ, লেফ-৮ এবং লেফ-৯-কে সনাক্তকরণ বস্তু হিসেবে ব্যবহার করা হয়েছিল এবং জিনের সিকোয়েন্সের সারিবদ্ধতার মাধ্যমে, হোমোলজি উচ্চ ছিল, সবই ১০০% পর্যন্ত পৌঁছেছিল।দ্রুত আণবিক সনাক্তকরণ পদ্ধতি আবারও নিশ্চিত করেছে যে AcMNPV Spodoptera frugiperda বিরুদ্ধে ভাল পোকামাকড় কার্যকারিতা আছে, যা স্পোডোপটার ফ্রুগিপার্ডার প্রতিরোধ ও নিয়ন্ত্রণে আরও প্রচার এবং প্রয়োগের জন্য উপযুক্ত।

২০১৯ সাল থেকে, স্পোডোপটার ফ্রুগিপার্ডা চীন আক্রমণ করেছে এবং কর্ণের একটি গুরুত্বপূর্ণ কীটপতঙ্গ হয়ে উঠেছে। এটি দক্ষিণ ও দক্ষিণ-পশ্চিম চীনের কিছু অঞ্চলে একটি স্থায়ী জনসংখ্যা গঠন করেছে,চীনের ময়না শিল্পে বিপুল ক্ষতির কারণ হয়ে ওঠে এবং চীনের খাদ্য নিরাপত্তাকে মারাত্মকভাবে হুমকি দেয়।^[16]. চীনে স্পোডোপটার ফ্রুগিপার্ডার বর্তমান গুরুতর প্রতিরোধ ও নিয়ন্ত্রণের পরিস্থিতির মুখোমুখি হয়ে,স্পোডোপ্টেরা ফ্রুগিপার্ডার প্রতিরোধ ও নিয়ন্ত্রণের জন্য কার্যকর কীটনাশকগুলির স্ক্রিনিং এবং বিকাশকে ত্বরান্বিত করা জরুরি^[17]যদিও ভাইরাল কীটনাশকগুলি তাদের ধীর গতির কার্যকারিতা এবং সংকীর্ণ কীটনাশক বর্ণালীর কারণে তাদের ব্যাপক প্রয়োগকে সীমাবদ্ধ করেছে,পরিবেশ ও পরিবেশ রক্ষার প্রতি ক্রমবর্ধমান মনোযোগের প্রেক্ষাপটেপ্রচলিত কীটনাশকগুলির তুলনায় তাদের উল্লেখযোগ্য সুবিধার কারণে কৃষি উৎপাদনে বেকুলোভাইরাস কীটনাশক ক্রমবর্ধমানভাবে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হবে বলে আশা করা হচ্ছে।উচ্চ তাপমাত্রার মত বাহ্যিক অবস্থার প্রতি পোকামাকড় ভাইরাস প্রস্তুতির সংবেদনশীলতার কারণে[1] অতএব, কীটপতঙ্গের লার্ভা হওয়ার শীর্ষ সময়ের মধ্যে কীটনাশক প্রয়োগ করার পরামর্শ দেওয়া হয়। এটি 4:00-5:XNUMX এর পরে ব্যবহার করা ভালঃউচ্চ তাপমাত্রা এবং আলোর মতো প্রতিকূল পরিবেশের প্রভাব এড়াতে সানলি দিনগুলিতে 00.00, যাতে ভাইরাস ফর্মুলেশন তার ভূমিকা আরও ভালভাবে পালন করতে পারে এবং কীটপতঙ্গের উপর নিয়ন্ত্রণের প্রভাব উন্নত করতে পারে।